GDF-8 1mg/injekčná liekovka výrazne podporuje svalovú hmotu a zlepšenie sily

Úvod do jadra GDF-8 1mg/fľaša

Myostatín|Transforming Growth Factor- Člen superrodiny 1 mg/liekovka

Generický názov: myostatín (rastový diferenciačný faktor-8)

anglický názov: myostatín (rastový diferenciačný faktor 8, GDF-8)

Štruktúra bielkovín: Zrelé peptidy sú homodiméry, pričom každý reťazec obsahuje približne 110 aminokyselín.

Molekulová hmotnosť: Približne 25 kDa (monomérna forma)

Čistota: Väčšie alebo rovné 90 % (SDS-PAGE/HPLC)

Obsah: 1 mg/fľaša

Vzhľad: Biely lyofilizovaný prášok

Skladovanie: Zmrazte na -80 stupňov, chráňte pred svetlom a skladujte na suchom mieste.

Návod na použitie a skladovanie

GDF-8 (myostatín):

GDF-8, člen nadrodiny transformujúcich rastových faktorov-, je primárne exprimovaný v kostrovom svale. Ako negatívny regulátor svalového rastu presne riadi hmotu kostrového svalstva väzbou na signálnu dráhu aktivínového receptora IIB/ALK4/5, čím inhibuje proliferáciu a diferenciáciu myoblastov. Ako kľúčový proteín signalizujúci negatívnu spätnú väzbu pre rast svalov hrá ústrednú úlohu v experimentálnych modeloch vývoja svalov, regenerácie, atrofie (ako je rakovinová kachexia a sarkopénia súvisiaca s vekom) a metabolických ochorení. V porovnaní s proanabolickými faktormi poskytujú jeho negatívne regulačné charakteristiky jedinečnú perspektívu pre pochopenie rovnovážnych mechanizmov svalovej homeostázy.

Vďaka svojej zásadnej negatívnej regulačnej úlohe pri raste svalov je GDF-8 široko používaný výskumníkmi v oblasti svalovej biológie, regeneratívnej medicíny, fyziológie cvičenia a metabolických chorôb. V porovnaní s modelmi génového knockoutu poskytuje jeho rekombinantná proteínová forma štandardizovaný experimentálny nástroj na presné riadenie intenzity inhibičných signálov, štúdium odozvy na dávku{4}}a časových procesov in vitro a in vivo. Jeho aplikácia v štúdiách porúch svalovej regenerácie, modelov svalovej atrofie a metabolického výskumu súvisiaceho s interakciami svalov a tuku poskytuje základ pre hodnotenie potenciálnych intervenčných stratégií zameraných na dráhu GDF-8.

Aplikácie GDF-8:

Ako klasický negatívny regulátor rastu svalov sa používa v modeloch in vitro a in vivo na presnú simuláciu alebo zosilnenie inhibičných signálov rastu svalov, čím sa študujú jeho inhibičné účinky na proliferáciu, diferenciáciu, hmotu a funkciu kostrového svalstva. Primárne sa používa na skúmanie molekulárnych mechanizmov svalovej atrofie, zhoršenej regenerácie svalov a interakcií medzi svalmi a inými tkanivami (ako je tuk a kosť).

Je široko používaný v modeloch svalovej atrofie, štúdiách funkcie myoblastov/satelitných buniek, experimentoch s regeneráciou svalov a výskume svalových metabolických porúch súvisiacich s obezitou a cukrovkou. Jeho štandardizovaná forma rekombinantného proteínu poskytuje základný výskumný nástroj na hodnotenie nových liekov proti-muskulárnej atrofii, štúdium molekulárneho základu adaptácie na cvičenie a skúmanie terapeutických stratégií zameraných na signalizáciu GDF-8.

Spôsoby použitia a skladovania

1. Rekonštitúcia a príprava:

Odporúčané rozpúšťadlo:

Výhodné rozpúšťadlo: Zrieďte roztok kyseliny octovej s pH 4,0-5,0 (napr. 20 mM kyselina octová).

Nosič kľúčov: Musí sa pridať nosný proteínk rozpúšťadlu a všetkým riedidlám;odporúča sa sterilný roztok kyseliny octovej s obsahom 0,1 % hovädzieho sérového albumínu (BSA).

Riedenie pracovného roztoku: Zrieďte na fyziologické pH ssterilné PBS alebo bunkové kultivačné médium obsahujúce 0,1-1 % BSA.

Absolútne zakázané: Je prísne zakázané priamo rozpúšťať alebo riediť proteín čistou vodou, neutrálnym PBS alebo roztokmi bez nosných proteínov,inak dôjde k ireverzibilnej agregácii proteínov, precipitácii a inaktivácii.

Štandardný postup prípravy:

Príprava rozpúšťadla:

Pripravte 20 mM sterilný roztok kyseliny octovej obsahujúci 0,1 % BSA (alebo nosný proteín vyššej čistoty) a prefiltrujte ho cez 0,22 μm filtračnú membránu.

Rozpúšťadlo je potrebné pred použitím-ochladiť na ľade.

Postup rekonštitúcie:

Vykonajte postup na ľade. Do 1 mg injekčnej liekovky pridajte 1,0 ml vopred vychladeného kyslého nosičového proteínového rozpúšťadla.

Pomocou mikropipety vstreknite vzorku veľmi pomaly pozdĺž steny fľaše, aby ste zabránili vytváraniu vzduchových bublín alebo priamemu nárazu na lyofilizovaný- koláč.

Položte injekčnú liekovku na ľad ajemne ho otáčajte vodorovne po dobu 5-10 minútkým sa prášok úplne nerozpustí.Nevírte, netraste, nefúkajte ani násilne nehýbte.

Konečná koncentrácia: 1 mg/ml (približne 40 μM) kyslého zásobného roztoku.

Dávkovanie a gradientové riedenie:

Okamžite rozdeľte na jednotlivé dávky 2-10 μl pomocou silanizovaných centrifugačných skúmaviek s nízkou adsorpciou na ľade.

Pri riedení najskôr zrieďte kyslý zásobný roztok aspoň 100-krát s PBS alebo kultivačným médiom obsahujúcim 0,1 – 1 % BSA, aby sa neutralizovalo pH. Napríklad, vezmite 1 μl zásobného roztoku a pridajte ho do 99 μl PBS obsahujúceho 1 % BSA, aby ste získali prechodný roztok 10 ug/ml.

Medziproduktový roztok sa potom zriedi na konečnú pracovnú koncentráciu. Všetky kroky riedenia sa uskutočňujú na ľade.

Jasne označené: GDF-8, koncentrácia, pH, dátum prípravy, číslo šarže, teplota skladovania.

Referenčná pracovná koncentrácia:

Bunkové experimenty in vitro: Bežne používaný rozsah koncentrácie je 0,1 až 5 ug/ml (približne 4 až 200 nM), ktorý je potrebné optimalizovať podľa typu bunky a experimentálneho účelu.

In vivo pokusy na zvieratách: Dávkovanie sa musí presne určiť podľa modelu a spôsobu podania (napr. intraperitoneálne, intramuskulárne, intravenózne) na základe literatúry. Bežne používaný rozsah je v rozsahu ug/kg až mg/kg amusia sa vykonať predbežné experimenty.

Príklad výpočtu: Na prípravu 100 ng/ml pracovného roztoku odoberte 1 μl 10 ug/ml prechodného roztoku a pridajte ho do 100 μl kultivačného média.

Kľúčové body, ktoré treba poznamenať:

Nízka teplota a šetrnosť: Celý proces musí prebiehať na ľade a pohyby musia byť mimoriadne jemnéaby sa zabránilo denaturácii bielkovín.

Nútené rozpustenie kyseliny: Musí sa rozpustiť v kyslom tlmivom roztoku (pH 4-5), ktorý je rozhodujúci pre udržanie jeho rozpustnosti a aktivity.

Nútené nosné proteíny: Rozpúšťanie a riedenie sa musí vykonávať pomocou roztokov obsahujúcich nosné proteíny, ako je BSAaby sa zabránilo adsorpcii a agregácii.

Cyklus zmrazovania-rozmrazovania je prísne zakázaný: Opakované cykly-rozmrazovania sú prísne zakázané; roztok sa musí dávkovať naraz. Zriedený pracovný roztoksa nesmie skladovať; musí sa ihneď pripraviť a použiť.

Pozorovanie stavu: Po rekonštitúcii má byť roztok číry a mierne opalescentný. Prítomnosť akejkoľvek vločkovej hmoty, častíc alebo zákalu naznačuje, že proteín je denaturovaný a agregovaný a roztok sa musí zlikvidovať.

2. Podmienky skladovania:

Nerekonštituovaný lyofilizovaný prášok:

Iba skladovanie: -80 stupňov (hlboké zmrazenie). Neskladujte pri teplote -20 stupňov.

Čas použiteľnosti: 12 mesiacov pri -80 stupňoch.

Prísne chrániť pred svetlom: Uchovávajte v originálnom -svetlom odolnom hliníkovom fóliovom vrecku s vysúšadlom vo vnútri.

Rekonštituovaný roztok:

Okamžité dávkovanie:Výdajmusí byť dokončená do 5 minútpo rekonštitúcii.

Prebalené a zmrazené: Možno skladovať iba pri -80 stupňoch, maximálna trvanlivosť 2 týždne, neodporúča sa skladovať.

Skladovanie je prísne zakázané: Zriedený pracovný roztok musínesmú byť uloženéa musí sa uchovávať na ľade a použiť do 4 hodín.

Podmienky prepravy:

Musí sa prepravovaťpodsuchý ľad(-78 stupňov).

Obal musí mať dostatok suchého ľadu a izolácie, aby sa zabezpečilo, že sa počas procesu nerozmrazí.

3. Stabilita a štandardy spracovania:

Fyzikálno-chemická stabilita:

Je citlivý na pH aje stabilný a rozpustný len pri kyslom pH (4,0-5,0). Ľahko agreguje a vyzráža sa pri neutrálnom a alkalickom pH.

Je mimoriadne citlivý na tepelné a mechanické namáhanie (vír, oscilácia, bublanie) a opakované cykly zmrazovania-rozmrazovania.

Je citlivý na povrchovú adsorpciu, preto sa musí použiť nosný proteín a nádoba s nízkou{0}}adsorpciou.

Udržiavanie bioaktivity:

štyri princípy: "kyslé rozpúšťanie, ochrana nosiča, šetrnosť pri nízkych{0}}teplotách a prísny zákaz cyklov zmrazovania-rozmrazovania“.

Potrebačokoľvek, kontaktujtenás

Populárne Tagy: gdf-8 1mg/liekovka výrazne podporuje zlepšenie svalovej hmoty a sily, Čína gdf{1}}mg/liekovka výrazne podporuje zlepšenie svalovej hmoty a sily výrobcovia, dodávatelia, továreň